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去垢剂技术平台
去垢剂技术平台系统筛选并应用 DDM、LMNG、DM、OG、CHAPS 等温和去垢剂,结合 CMC、胶束尺寸及蛋白–去垢剂比例(P/D ratio) 的精细优化,有效提升多次跨膜蛋白的构象稳定性与功能保持。平台采用面向下游应用的反向设计策略,确保膜蛋白在 Cryo-EM、SPR/BLI 及抗体筛选 等研究中具备良好的均一性与可用性。
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VLP技术平台
平台针对不同来源的 VLP(病毒衣壳蛋白、工程化结构蛋白)系统优化基因设计、表达系统与培养条件,有效促进颗粒级自组装。可获得结构完整、粒径均一、形态稳定的 VLP 颗粒,显著降低空壳、错误组装或异质性过高的问题。可获得结构完整、粒径均一、形态稳定的 VLP 颗粒,显著降低空壳、错误组装或异质性过高的问题。
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Nanodisc技术平台
纳米光盘(Nanodisc)技术平台基于 膜支架蛋白(MSP,如 MSP1D1) 与特定磷脂(如 POPC、DMPC)自组装形成稳定脂质双层,将多次跨膜蛋白以单颗粒、单构象方式重构于类天然膜环境中。相较传统去垢剂体系,纳米光盘显著降低构象异质性并提升构象稳定性、功能保持率与长期稳定性,可直接应用于 Cryo-EM、SPR/BLI 及抗体筛选 等高端结构与功能研究。
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Liposome技术平台
脂质体技术平台采用 POPC、POPE、DOPC、DMPC 等天然或合成磷脂,按需引入 胆固醇(Cholesterol) 调节膜流动性,通过 薄膜水化–挤出(extrusion)或冻融法 构建粒径可控的脂质体体系。
平台可制备 50–200 nm 粒径范围内、PDI < 0.2 的单分散脂质体,并通过体外重构形成 蛋白脂质体(proteoliposome),实现膜蛋白的高效嵌入与取向调控。
Frequently Asked Questions
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多次跨膜蛋白是指跨膜次数≥2 次的膜蛋白,通常包含多个疏水跨膜螺旋,广泛存在于信号转导、物质转运及细胞通讯过程中。由于其高度疏水、依赖膜环境维持构象,在体外表达和纯化过程中极易发生错误折叠、聚集或失活,因此对开发策略和技术经验要求极高。
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我们支持多种多次跨膜蛋白类型,包括但不限于:GPCR(G 蛋白偶联受体);离子通道蛋白;转运蛋白 / 泵蛋白
;多跨膜受体及信号蛋白。可覆盖 2–12 次以上跨膜结构,并根据蛋白特性定制开发方案。
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在纯化过程中,我们会系统优化:去垢剂类型与浓度(DDM、LMNG 等)、缓冲液体系与脂质环境模拟、低温、低剪切力操作流程、必要时可引入构象稳定突变设计或标签辅助策略,显著提升蛋白稳定性与功能保持率。
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多次跨膜蛋白可以用于哪些下游研究?是否提供验证数据?
开发完成的多次跨膜蛋白可应用于:结构研究(Cryo-EM、X-ray);抗体筛选与表征;药物小分子筛选;SPR / BLI 等分子互作分析,我们可按需求提供 SDS-PAGE、SEC、稳定性评估及功能验证数据,确保蛋白质量满足研究要求。
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